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DPPH自由基清除测定

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2025-06-29 13:09:33

在食品科学、药学及生物化学等领域中,评估物质的抗氧化能力是一项重要的研究内容。其中,DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验是一种广泛应用于测定抗氧化活性的经典方法。该方法操作简便、灵敏度高,能够有效反映样品中抗氧化成分的清除自由基的能力。

DPPH是一种稳定的有机自由基,其在可见光区(约517 nm)具有较强的吸收峰。当抗氧化物质与DPPH发生反应时,会将其还原为无色的DPPH-H,从而导致吸光度的降低。通过测定反应前后吸光度的变化,可以计算出样品对DPPH自由基的清除率。

实验过程中,通常需要配置一定浓度的DPPH溶液,并与不同浓度的样品溶液混合。在避光条件下反应一段时间后,使用分光光度计测定517 nm处的吸光度值。根据标准曲线或对照组数据,计算出样品的自由基清除率。该方法不仅适用于天然提取物,也常用于合成抗氧化剂的活性评估。

值得注意的是,实验结果受多种因素影响,如反应时间、温度、pH值以及样品的溶解性等。因此,在进行实验设计时,应尽量控制变量,确保实验结果的准确性和可重复性。

此外,尽管DPPH法具有操作简单、成本低廉的优势,但它主要针对脂溶性抗氧化物质,对于水溶性物质的检测可能不够灵敏。因此,在实际应用中,常结合其他方法(如ABTS自由基清除法、羟基自由基清除法等)进行全面评估。

综上所述,DPPH自由基清除实验是评价抗氧化能力的重要手段之一,合理设计实验条件并结合多种检测方法,有助于更全面地了解样品的抗氧化特性。

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