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酵母双杂交系统

2025-09-16 09:26:56

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2025-09-16 09:26:56

酵母双杂交系统】一、

酵母双杂交系统(Yeast Two-Hybrid System,简称Y2H)是一种用于研究蛋白质相互作用的实验技术。该系统基于转录因子的功能特性,通过将目标蛋白与DNA结合域(BD)和转录激活域(AD)分别融合,检测两者是否发生相互作用。若两个蛋白在细胞内发生互作,则可激活报告基因的表达,从而实现对蛋白质-蛋白质相互作用的筛选与验证。

该系统广泛应用于分子生物学、生物化学及功能基因组学领域,尤其在鉴定新蛋白相互作用、探索信号通路以及构建蛋白质相互作用网络中具有重要价值。尽管该技术具有高效、快速等优点,但也存在一定的局限性,如假阳性结果、无法检测膜蛋白或非直接相互作用等。

二、表格展示

项目 内容
中文名称 酵母双杂交系统
英文名称 Yeast Two-Hybrid System (Y2H)
原理 基于转录因子的结构功能,利用DNA结合域(BD)和转录激活域(AD)的互补作用来检测蛋白质间相互作用
主要组件 - DNA结合域(BD)
- 转录激活域(AD)
- 报告基因(如LacZ、HIS3、ADE2等)
- 酵母菌株(如AH109、Y187等)
应用领域 - 蛋白质相互作用研究
- 信号通路分析
- 功能基因组学
- 新药靶点筛选
优点 - 操作简便
- 成本较低
- 可高通量筛选
- 灵活性强
缺点 - 易出现假阳性或假阴性结果
- 无法检测膜蛋白或细胞外蛋白
- 依赖于酵母细胞内的环境条件
- 不能反映体内真实相互作用情况
常见报告基因 LacZ、HIS3、ADE2、MEL1等
常用酵母菌株 AH109、Y187、PGY40、Y850等
发展历史 由Fields和Song于1989年首次提出,是研究蛋白质相互作用的经典方法之一

三、结语

酵母双杂交系统作为蛋白质相互作用研究的重要工具,在生命科学研究中发挥了不可替代的作用。随着技术的不断改进与完善,其应用范围也在不断扩大。然而,为了提高实验结果的可靠性,研究人员应结合多种实验方法进行验证,以确保蛋白质相互作用的真实性与功能性。

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